Научной группой Кевина Эггана было показано, что для перепрограммирования путем переноса ядра можно использовать эмбриональные стволовые клетки. Анализ транскрипционной активности, активации репортерных генов, аллель-специфической экспрессии генов и профиля метилирования показал, что соматический геном был перепрограммирован в эмбриональное состояние после слияния с эмбриональной стволовой клеткой. В обоих случаях перепрограммирование прошло успешно, что доказывается возможностью получения мозаичных клонов на основе перепрограммированных CD4+ Т-лимфоцитов. Это соединение является ингибитором Tgf-бета сигнального каскада, которое способствует перепрограммированию путем индукции транскрипционного фактора Nanog. Лабораторией Кевина Эггана была исследована степень метилирования ДНК iPS. Выяснилось, что метилирование цитозина в них выше, чем в случае эмбриональных стволовых клеток. Было найдено 288 областей, по-разному метилированных в iPS и фибробластах. В лаборатории удалось получить iPS из клеток 82-летней пациентки с наследственной формой бокового амиотрофического склероза. Полученные iPS обладали свойствами эмбриональных стволовых клеток и были использованы для успешного получения двигательных нейронов — именно того типа клеток, который разрушается при боковом амиотрофическом склерозе. Впервые была показана возможность использования для перепрограммирования соматических ядер зиготы, остановленной в митозе и эмбриональных клеток, взятых на стадии двух бластомеров. Для снижения риска канцерогенеза нужно избавиться от необходимости доставки генов, необходимых для перепрограммирования, с помощью вирусов. В лаборатории Эггана было найдено соединение, которое может заменить Sox2. Эксперименты Эггана показали, что возраст пациента не является препятствием для получения iPS на основе его клеток.
Место работы — Гарвардский университет (Harvard University), США
Контакты — Sherman Fairchid Building, Rm 433 7 Divinity Avenue Cambridge, MA 02138, USA(617) 496–5611 eggan@scrb.harvard.edu
Публикации — Epigenetic instability in ES cells and cloned mice. Humpherys D, Eggan K, Akutsu H, Hochedlinger K, Rideout WM 3rd, Biniszkiewicz D, Yanagimachi R, Jaenisch R. Science. 2001 Jul 6;293(5527):95–7. Reprogramming after chromosome transfer into mouse blastomeres. Egli D, Sandler VM, Shinohara ML, Cantor H, Eggan K. Curr Biol. 2009 Aug 25;19(16):1403–9. Targeted bisulfite sequencing reveals changes in DNA methylation associated with nuclear reprogramming. Deng J, Shoemaker R, Xie B, Gore A, LeProust EM, Antosiewicz-Bourget J, Egli D, Maherali N, Park IH, Yu J, Daley GQ, Eggan K, Hochedlinger K, Thomson J, Wang W, Gao Y, Zhang K. Nat Biotechnol. 2009 Apr;27(4):353–60. Induced pluripotent stem cells generated from patients with ALS can be differentiated into motor neurons. Dimos JT, Rodolfa KT, Niakan KK, Weisenthal LM, Mitsumoto H, Chung W, Croft GF, Saphier G, Leibel R, Goland R, Wichterle H, Henderson CE, Eggan K.Science. 2008 Aug 29;321(5893):1218–21.
Исследовательские группы
Эгган, Кевин